• <option id="bw6nr"><p id="bw6nr"><u id="bw6nr"></u></p></option>

      <option id="bw6nr"></option>
        <option id="bw6nr"><p id="bw6nr"></p></option>
        <nobr id="bw6nr"></nobr><dl id="bw6nr"><p id="bw6nr"></p></dl>

      1. <nobr id="bw6nr"></nobr>
        <option id="bw6nr"></option>
        您的位置: 網(wǎng)站首頁(yè) >> 新聞資訊 >> 甲型流感病毒(IAV)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)新品

        甲型流感病毒(IAV)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)新品

        發(fā)布日期: 2023-03-29
        瀏覽人氣: 1924

        甲型流感病毒(IAV)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)新品

        【產(chǎn)品名稱(chēng)】

        商品名稱(chēng):甲型流感病毒(IAV)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)新品

        Name :Avian Influenza Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

        【包裝規格】50T/盒

        【預期用途】

        甲型流感是由甲型流感病毒(AIV)引起的一種禽類(lèi)傳染病,雞、火雞、鴨和鵪鶉等家禽均可感染,發(fā)病情況

        差別較大,有的出現急性死亡,有的無(wú)癥狀帶毒。水禽是 AIV 的自然宿主,也是流感病毒的天然基因庫,幾乎

        所有亞型的流感病毒都可以在水禽中分離到[1]。在世界范圍內,家禽中流行的主要有 H5、H6、H7、H9 等亞型。

        H5 和 H7 亞型的某些毒株可以造成禽類(lèi)很高的發(fā)病率和死亡率,被稱(chēng)為高致病性甲型流感(HPAI)病毒。OIE 將

        高致病性甲型流感列為 A 類(lèi)動(dòng)物疫病,我國也將其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病[2-3]。

        本試劑盒利用實(shí)時(shí)熒光 PCR 原理,檢測甲型流感病毒,對甲型流感診斷有重要指導意義。

        【檢驗原理】

        本試劑盒針對甲型流感病毒 M 基因高度保守區域設計特異性引物和探針,在反應體系中含甲型流感病毒基

        因組模板的情況下,PCR 反應得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用儀器對 PCR 過(guò)程中相應通道的信號強度進(jìn)行實(shí)時(shí)

        監測和輸出,實(shí)現檢測結果的定性、定量分析。

        【試劑組成】

        111111.png

        注:1)不同批號試劑不能混用。

        2)試劑盒內各試劑組份足夠包裝規格所標示的檢測次數。

        【儲存條件及有效期】

        -20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過(guò)5 次,有效期12 個(gè)月。

        【適用儀器】

        ABI 、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量PCR 檢測儀。

        【標本采集】

        病死或撲殺動(dòng)物,取喉氣管、腦、胸肌、心肌和肺等組織;待檢活動(dòng)物,用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄

        物,置于 1mL 50%甘油生理鹽水中。

        【保存和運輸】

        上述標本短期內可保存于-20℃,長(cháng)期保存可置-70℃,但不能超過(guò) 6 個(gè)月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,

        嚴禁反復凍融。

        【使用方法】

        1. 樣品處理(樣本處理區)

        1.1 樣本前處理

        每份組織分別從 3 個(gè)不同的位置稱(chēng)取樣品約 1g,手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生

        理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離

        心管中;棉拭子直接取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。

        1.2 核酸提取

        推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提

        取,請按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

        2. 試劑配制(試劑準備區)

        根據待檢測樣本總數,設所需要的PCR 反應管管數為N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽(yáng)性對照;反應管數

        每滿(mǎn)10 份,多配制1 份),每測試反應體系配制如下表:

        22222.png

        將混合好的測試反應液分裝到PCR 反應管中,21uL/管。

        3. 加樣(樣本處理區)

        將步驟1 提取的核酸、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μL,分別加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,

        短暫離心。

        4. PCR 擴增(核酸擴增區)

        4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR 儀反應槽內;

        4.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為25μL;熒光通道選擇:

        檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇ROX 參比熒光,

        選擇None 即可。

        4.3 推薦循環(huán)參數設置:

        3333.png

        5. 結果分析判定

        5.1 結果分析條件設定

        設置Baseline 和Threshold:一般直接按機器自動(dòng)分析的結果分析,當曲線(xiàn)出現整體傾斜時(shí),根據分析后圖像

        調節Baseline 的start 值(一般可在3~15 范圍內調節)、stop 值(一般可在5~20 范圍內調節),以及Threshold 的

        Value 值(上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對照),重新分析結果。

        5.2 結果判斷

        陽(yáng)性:檢測通道Ct 值≤35,且曲線(xiàn)有明顯的指數增長(cháng)曲線(xiàn);

        可疑:檢測通道35<Ct 值≤38,建議重復檢測,如果檢測通道仍為35<Ct 值≤38,且曲線(xiàn)有明顯的增長(cháng)曲線(xiàn),

        判定為陽(yáng)性,否則為陰性;

        陰性:樣本檢測結果Ct 值>38 或無(wú)Ct 值。

        6. 質(zhì)控標準

        陰性質(zhì)控品:Ct>38 或無(wú)Ct 值顯示;

        陽(yáng)性質(zhì)控品:擴增曲線(xiàn)有明顯指數生長(cháng)期,且Ct 值≤32;以上條件應同時(shí)滿(mǎn)足,否則實(shí)驗視為無(wú)效。

        7.檢測方法的局限性

        1.樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);

        2.樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,會(huì )出現假陽(yáng)性結果;

        3.陽(yáng)性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會(huì )導致假陽(yáng)性結果;

        4.病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì )導致假陰性結果;

        5.不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì )導致假陰性結果;

        6.試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果;

        7.本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

        【注意事項】

        1.所有操作嚴格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;

        2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,混勻并短暫離心;

        3.反應液應避光保存;

        4.反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

        5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區專(zhuān)用工作服;

        6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進(jìn)行,以免交叉污染;

        7.實(shí)驗完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

        8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全通則》進(jìn)行處理。

        【參考文獻】

        [1] Webster R G, Bean W J, Gorman O T, et al. Evolution and ecology of influenza A viruses [J]. Microbiological

        Reviews, 1992, 56(1): 152-179.

        [2] Shortridge K. Avian influenza A viruses of southern China and Hong Kong: ecological aspects and implications for

        man [J]. Bulletin of the World Health Organization, 1982, 60(1): 129.

        [3] 張燁, 舒躍龍. 2004–2012 年我國甲型流感流行情況 [J]. 中華實(shí)驗和臨床病毒學(xué)雜志, 2013, 27(3): 239-240.【生

        產(chǎn)企業(yè)】

        企業(yè)名稱(chēng):上海晅科生物科技有限公司


        分享到:
        版權所有©2019 上海晅科生物科技有限公司 備案號:滬ICP備19006485號-1
        • 掃一掃,關(guān)注我們

        公交车大龟廷进我身体里,国产伦精品免编号公布,精品三级av无码一区,a级毛片免费完整视频
      2. <option id="bw6nr"><p id="bw6nr"><u id="bw6nr"></u></p></option>

          <option id="bw6nr"></option>
            <option id="bw6nr"><p id="bw6nr"></p></option>
            <nobr id="bw6nr"></nobr><dl id="bw6nr"><p id="bw6nr"></p></dl>

          1. <nobr id="bw6nr"></nobr>
            <option id="bw6nr"></option>